產(chǎn)品概述
Thermo Scientific NAb 蛋白 G 離心試劑盒便于對各種樣品類型中的抗體進(jìn)行快速、小規(guī)模親和純化。固定化蛋白樹脂的每個預(yù)裝微量離心柱可從 0.5-2 mL 血清或其他樣品中快速純化 11-15 mg 人 IgG。每個試劑盒都包括足夠用于純化至少兩份抗體樣品的收集管、緩沖液和簡化方案。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖是一種優(yōu)質(zhì)的親和樹脂，可用于抗體純化。該產(chǎn)品包含已共價固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的重組蛋白 G。提供高品質(zhì)親和樹脂的各類組合，靈活適用于各種層析應(yīng)用，實現(xiàn)哺乳動物血清樣品完整IgG的高產(chǎn)量和高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于許多親和純化系統(tǒng)。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖的特點：
?蛋白 G – 固定化蛋白 G 適用于從小鼠、人、牛、山羊和綿羊血清中純化多克隆 IgG（包括人 IgG3 和小鼠 IgG1 同種型）
? 瓊脂糖樹脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法的最常用樹脂
? 惰性且穩(wěn)定–優(yōu)越的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 G，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標(biāo)準(zhǔn)容量–Pierce 蛋白 G 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 G，提供 11 至 15 mg 人 IgG/mL 樹脂的結(jié)合容量
蛋白 G 是源自 G 群鏈球菌的細(xì)菌細(xì)胞壁蛋白，現(xiàn)可在大腸桿菌中以重組形式生產(chǎn)。與蛋白A相同，蛋白G可與大多數(shù)哺乳動物的免疫球蛋白結(jié)合，結(jié)合部位主要為其Fc區(qū)。天然蛋白G包含兩個免疫球蛋白結(jié)合位點以及白蛋白和細(xì)胞表面結(jié)合位點。重組形式的蛋白G中已除去這些白蛋白及細(xì)胞表面結(jié)合位點，以減少免疫球蛋白純化過程中的非特異性結(jié)合。重組蛋白 G 的質(zhì)量約為 21.6 kDa，但通過 SDS-PAGE 法測得的表觀大小為 31 至 34 kDa。IgG 結(jié)合功能在 pH 值為 5 時最佳，但在近中性條件（pH 值 7.0 至 7.2）下也可高效結(jié)合。
與蛋白 A 相比，蛋白 G 可與人、小鼠和大鼠血清中更廣泛的 IgG 亞類結(jié)合。特別是，除了與蛋白 A 一樣能夠結(jié)合其他同種型之外，蛋白 G 還對人 IgG3、小鼠 IgG1 和大鼠 IgG 的全部三種亞型表現(xiàn)出更強(qiáng)的結(jié)合能力。因此，在涉及這些物種和抗體亞型的應(yīng)用中一般建議采用蛋白G。關(guān)于其他物種，蛋白 G 對牛、山羊和綿羊 IgG 的結(jié)合能力更強(qiáng)，但對豬、豚鼠、犬和貓 IgG 的結(jié)合能力弱于蛋白 A。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備，該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項優(yōu)勢。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團(tuán)，從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。其產(chǎn)生的高結(jié)合力樹脂在多次抗體純化之后仍然能保留固定化蛋白G的結(jié)合功能。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖可從許多哺乳動物物種的血清和其他液體中有效地親和純化 IgG。蛋白 G 特別適于配合使用